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• 氣相色譜法（GC）：
  • 原理：通過(guò)極性毛細(xì)管柱將順、反式脂肪酸分離并測(cè)定。GC法是我國(guó)國(guó)標(biāo)和AOCS標(biāo)準(zhǔn)中使用較多的方法，具有高靈敏度和高分離度的特點(diǎn)。
  • 步驟：樣品經(jīng)過(guò)甲酯化處理后，使用長(zhǎng)100m的氰丙基硅氧烷柱（如SP 2560或CP Sil 88）進(jìn)行分離，反式異構(gòu)體在順式異構(gòu)體前流出。
  • 特點(diǎn)：適用于人工反式脂肪酸的檢測(cè)，近年來(lái)離子液體色譜柱（如SLB-IL111）的引入進(jìn)一步提高了分離效果。
    
• 紅外光譜法（IR）：
  • 原理：利用非共軛反式雙鍵在紅外966 cm?1處有最大吸收峰的特性進(jìn)行測(cè)定，峰面積與濃度呈線性關(guān)系。
  • 步驟：將油脂中的脂肪酸進(jìn)行甲酯化處理后，在900-1050 cm?1波數(shù)范圍內(nèi)進(jìn)行紅外光譜分析。
  • 特點(diǎn)：快速方便，適用于測(cè)定5%以上反式脂肪酸的油樣。衰減全反射傅里葉變換紅外光譜法（ATR-FTIR）及負(fù)二階導(dǎo)數(shù)法能解決共軛雙鍵、游離羧基和甘油羥基的干擾，測(cè)到含量<1%的反式脂肪酸。
    
• 銀離子色譜法（Ag+-TLC/Ag+-HPLC）：
  • 原理：Ag+對(duì)雙鍵的絡(luò)合強(qiáng)度隨雙鍵數(shù)而增強(qiáng)，隨鏈長(zhǎng)而減弱，據(jù)此可分析脂肪酸的順、反異構(gòu)體。
  • 步驟：Ag+-TLC將順、反式脂肪酸分離成不同譜帶，用溶劑萃取后再定量；Ag+-HPLC則直接用于順、反式不飽和脂肪酸的分離。
  • 特點(diǎn)：適用于天然反式脂肪酸的檢測(cè)，尤其是乳脂中復(fù)雜的共軛反式脂肪酸成分。Ag+-HPLC相比Ag+-TLC具有更高的分離度和操作便捷性。
    
• 氣相色譜質(zhì)譜法（GC-MS）：
  • 原理：結(jié)合氣相色譜的分離能力和質(zhì)譜的定性能力，對(duì)反式脂肪酸進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定。
  • 步驟：樣品經(jīng)過(guò)甲酯化處理后，使用氣相色譜進(jìn)行分離，質(zhì)譜檢測(cè)器進(jìn)行定性定量分析。
  • 特點(diǎn)：具有較寬的檢測(cè)范圍和較高的檢測(cè)水平，且不會(huì)降解目標(biāo)分析物。適用于復(fù)雜樣品中反式脂肪酸的檢測(cè)。